人可溶性E选择素(sE-selectin)ELISA试剂盒
产品别名： 人可溶性E选择素(sE-selectin)检测试剂盒
人可溶性E选择素(sE-selectin)ELISA试剂盒原理的简要说明书：sE-selectin (可溶性E选择素), 可溶性E-选择素分子是由内皮细胞分泌或膜表面E-选择素分子脱落形成。E-选择素由内皮细胞表达，以受体配体的方式发挥作用，参与体内炎症细胞的滚动、游走过程。受炎症、缺血再灌注后氧自由基增多等多种刺激时，E-选择素分子开始脱落可致使血浆中可溶性粘附分子水平提高。
人可溶性E选择素(sE-selectin)ELISA试剂盒自备材料
1．蒸馏水。
2．加样器：5ul、10ul、50ul、100ul、200ul、500ul、1000ul。
3．振荡器及磁力搅拌器等。
标本要求
1．标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验，可将标本放于-20℃保存，但应避免反复冻融
2．不能检测含NaN3的样品，因NaN3抑制辣根过氧化物酶的（HRP）活性。
操作步骤
1.标准品的稀释：本试剂盒提供原倍标准品一支，用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。
16μg/L 5号标准品 150μl的原倍标准品加入150μl标准品稀释液
8μg/L 4号标准品 150μl的5号标准品加入150μl标准品稀释液
4μg/L 3号标准品 150μl的4号标准品加入150μl标准品稀释液
2μg/L 2号标准品 150μl的3号标准品加入150μl标准品稀释液
1μg/L 1号标准品 150μl的2号标准品加入150μl标准品稀释液
2.加样：分别设空白孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）、标准孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样50μl，待测样品孔中先加样品稀释液40μl，然后再加待测样品10μl（样品最终稀释度为5倍）。加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀。
3.温育：用封板膜封板后置37℃温育30分钟。
4.配液：将20倍浓缩洗涤液用蒸馏水20倍稀释后备用
5.洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置30秒后弃去，如此重复5次，拍干。
6.加酶：每孔加入酶标试剂50μl，空白孔除外。
7.温育：操作同3。
8.洗涤：操作同5。
9.显色：每孔先加入显色剂A50μl，再加入显色剂B50μl，轻轻震荡混匀，37℃避光显色15分钟.
10.终止：每孔加终止液50μl，终止反应（此时蓝色立转黄色）。
11.测定：以空白空调零，450nm波长依序测量各孔的吸光度（OD值）。 测定应在加终止液后15分钟以内进行。