最新发布的志贺氏菌国标GB_4789.5-2012(食品安全国家标准_食品微生物学检验_志贺氏菌检验方法)于2012年7月17日实施，新国标中关于增菌部分有重大改变，要求在厌氧条件下增菌过夜。很多微生物工作者在讨论用什么方法来实现厌氧增菌，由于增菌时可采用三角瓶、试剂瓶或均质袋，放在何种容器中进行增菌，要根据样品容量、增置设备的承受能力等各种因素进行综合考虑。重庆江雪科技给广大有检测志贺氏菌需求的客户推荐几种解决方案。
志贺氏菌检测新国标厌氧条件增菌的解决方案
新颁国标
2012年5月17日，中华人民共和国卫生部颁GB 4789.5-2012《食品安全国家
标准食品微生物学检验 志贺氏菌检验方法》，于2012年7月17日起实施。
该标准实施之日起，原GB/T4789.5-2003标准作废。
该标准实施之日起，原GB/T4789.5-2003标准作废。
解读GB4789.5-2012
为了提高食品中志贺氏菌检出率，降低操作者的操作要求，增菌过程的调整是本次新标准最大的变动之处。
两份国标方法之间增菌部分的主要区别如下表所示：
为了提高食品中志贺氏菌检出率，降低操作者的操作要求，增菌过程的调整是本次新标准最大的变动之处。
两份国标方法之间增菌部分的主要区别如下表所示：
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GB4789.5-2003
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GB4789.5-2012
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增菌培养基
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GN增菌肉汤
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志贺氏菌增菌肉汤-新生霉素
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取样操作
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无菌均质器或研钵
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无菌均质器或拍击式均质器
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增菌培养条件
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37℃，有氧培养6~8小时
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41.5℃，厌氧培养16~20小时
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……
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……
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……
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更改增菌培养方式的最终目的是最大程度消除食物样品中的杂菌背景对于检测培养的影响。
1、厌氧环境41.5℃培养，可排除需氧菌和大部分不耐热的厌氧菌与兼性厌氧菌干扰；
2、使用志贺氏菌增菌肉汤-新生霉素进行增菌，可排除革兰氏阳性菌和部分革兰氏阴性肠杆菌（如变形杆菌等）的干扰；
减少杂菌背景的同时，也降低了杂菌在增菌过程中对于数量很少的志贺氏菌的竞争抑制作用，可有效地提高志贺氏菌的扩增量，有助于进一步的分离与鉴定。
厌氧增菌的解决方案
不同于常规厌氧培养，本标准中的增菌培养是在无菌三角烧瓶或无菌匀质袋中进行，故厌氧袋因容积限制而无法使用，因此推荐以下专业解决方案：
解决方案一：每日样品检测量30~50份的实验室，建议配备AG300型厌氧工作站。
型号 AG300
最大培养容量： 50只（250ml标准三角烧瓶）
30只（500ml标准三角烧瓶）
传输舱容量： 2只（250/500ml标准三角烧瓶）
（* 三角烧瓶底径需小于100mm，高度小于200mm）
解决方案二：
每日样品检测量极少（≤30份）的实验室，A30厌氧培养系统，此方案需要将厌氧罐放入生化培养箱中培养。
型号 A30厌氧培养系统配20L培养罐
最大培养容量： 20只（250ml标准三角烧瓶）