爱思益普专注于基于靶点的先导化合物筛选和优化，批量构建了新药筛选的靶点和筛选技术，致力于以高效、专业的服务，帮助新药研发企业快速有效地推进新药研发项目。在POLθ项目中我们构建了三种不同的生化方法分别用于POL θ-N ATPase抑制剂的筛选和POL θ-C polymerase抑制剂筛选，同时爱思益普可提供相关蛋白产品。
1.POL θ-N ATPase抑制剂筛选_ADP-Glo assay
2.POL θ-C polymerase抑制剂筛选_ PicoGreen方法
在此方法中，我们合成了Template和Primer，以dNTP为原料，利用POL θ-C polymerase活性合成dsDNA，用PicoGreen试剂测定化合物对POL θ-C活性的抑制能力。
3.POL θ-C polymerase抑制剂筛选_TR-FRET 方法
PicoGreen可以测定化合物对POL θ-C抑制率，但是该方法是利用PicoGreen试剂来检测dsDNA的合成，一方面Template和Primer本身就可形成dsDNA双链，本底高，窗口小，耗时长，对于操作要求高。其次PicoGreen试剂读取的是荧光强度，会受到反应体系来源荧光的干扰;最后，PicoGreen方法在dNTP类似物的抑制剂筛选过程中并不能区分具体的(dATP , dCTP, dGTP, dTTP) 类似物类型。
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