中和抗体检测——RSV疫苗评价金标准
呼吸道合胞病毒（Respiratory syncytial virus，RSV）是一种包膜单股负链RNA病毒， RSV可以引起全年龄段人群的呼吸道感染，是世界范围内引起5岁以下儿童急性下呼吸道感染（ALRTI）最常见的病毒病原，是造成婴幼儿病毒性呼吸道感染住院的首要因素。
目前对于RSV的防治手段主要是疫苗及抗体药物，中和抗体检测是鉴定疫苗有效性的黄金标准，迪福润丝生物采用的荧光斑点计数法（图1）通过DIFF-GFP荧光报告病毒检测标记病毒抗原的荧光抗体，可以识别早期感染和低水平的病毒复制，24小时即可得到结果，无需等待病毒大量复制引起明显的细胞病变及合胞体影响。
图1.荧光斑点计数法-RSV中和抗体检测的实验结果案例（左上角为荧光数值）
快速准确的荧光斑点计数法
迪福润丝生物建立了完善的生物资源库（Bio Database）,可提供丰富的RSV毒株进行更加准确可靠的疫苗评价。检测用毒株包括RSV A和RSV B两种亚型共8种毒株，其中两株为临床株RSV-B 9393及2444（图2），有助于准确了解药物及疫苗对自然感染的有效性。
图2.迪福润丝生物RSV临床株进化树
一天出结果！RSV中和抗体检测服务流程
迪福润丝生物自有的的CRO服务平台「DIFF+」可针对RSV疫苗效果进行评价，提供基于荧光斑点计数法的RSV中和抗体检测服务（图3），该检测方法能够与传统的PRNT检测方法建立线性相关性，灵敏度高、检测迅速（24h即可出结果），并且该实验方法的特异性、重复性均能满足中和实验的要求，适用于高通量样本的检测。
图3.RSV中和抗体检测流程图
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RSV中和抗体检测服务案例
基于上文所示的检测流程，通过DIFF-GFP荧光报告病毒，迪福润丝生物可进行RSV疫苗中和抗体检测及抗病毒药物筛选等服务，24小时可快速得到实验结果。将待测样本与RSV病毒共孵育后加入待感染细胞，CC孔为细胞对照，不加病毒，VC孔为病毒对照，只加病毒，检测结果如图（图4）所示。
图4.RSV中和抗体检测结果案例
根据荧光斑点计数仪的斑点计数结果，半中和滴度NT50使用GraphPad Prism软件中的非线性回归分析计算值（图5）。
图5.RSV中和抗体检测样本1-2中和浓度曲线图
服务内容
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RSV真病毒血清中和抗体检测服务 |
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样本类型 |
血清、血浆或抗体样本 |
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检测方法 |
荧光斑点计数法 |
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质控标准 |
提供自研的阳性对照（单抗） |
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成果交付 |
检测报告 |