Celthy PEI转染试剂（AAV专用）
产品名称： Celthy PEI转染试剂（AAV专用）
英文名称： Celthy AAV Transfection Reagent
产品编号： C130005
产品价格：
产品产地： 美国
品牌商标： Arcegen
更新时间： 2024-12-16T10:25:23
使用范围： null
| 规格 | 价格 |
| 10ml | 18000.0 |
| 1ml | 3200.0 |
| 100ul | 550.0 |
- 联系人 : 钟珍
- 地址 : 申江南路4388号1幢2层208室
- 邮编 : 201314
- 所在区域 : 上海
- 电话 : 139****6764 点击查看
- 传真 : 点击查看
- 邮箱 : zhongz@magibagbio.com
- 二维码 : 点击查看
产品简介
本试剂是一种专为悬浮体系规模化生产AAV而开发,产品是经过优化改造后的线性化聚乙烯亚胺（PolyethylenimineLinear,PEI）。本产品纯化学合成，不含动物源成分，细胞毒性低，产品以无菌液体形式提供，具备广泛的AAV血清型适用性。本产品DNA荷载能力强、转染复合物比例低和复合物稳定性高，为大规模AAV生产提供便利。
组分信息
|
组分名称 |
C130005S | C130005M |
| Celthy AAV Transfection Reagent |
100 μL |
1 mL |
储存条件
2-8ºC保存，有效期2年。
转染操作流程
1、接种细胞
根据细胞状态，选择合适的接种密度，建议细胞接种密度为1-1.5E6 cells/mL，使第二天转染时细胞密度为2-3E6 cells/mL 为宜。
2、转染复合物配置(以1 L体系为例)
1）质粒与试剂比例：质粒（μg）与转染试剂（μL）为1:0.5-1:2。
2）质粒稀释：使用25 mL无血清培养基稀释2 mg质粒，并轻轻混匀。
3）试剂稀释：使用25 mL无血清培养基稀释2 mL Celthy AAV Transfection Reagent转染试剂，并轻轻混匀。
4）配置复合物：将配置好的25 mL质粒稀释液加入到25 mL转染试剂稀释液中，轻轻涡旋混匀后，室温静置20 min，形成质粒-PEI复合物，备用。
表 1 转染复合物参数（仅供参考）
|
参数类型 |
推荐条件 |
条件范围 |
|
核酸用量（每百万细胞） |
1 μg |
0.5 μg-2 μg |
|
核酸与转染试剂比例（μg:μL） |
1:1 |
1:0.5-1:2 |
|
转染复合物体积（%培养体积） |
5% |
1%-10% |
|
复合物孵育时间 |
20 mins |
15 mins-60 mins |
|
复合物介质（无血清等添加物） |
无血清培养基 |
无血清培养基，PBS |
3、转染细胞
1）直接将50 mL的质粒-PEI复合物均匀加入细胞中。
2）在37℃温度与5% CO2条件下继续培养细胞，并在培养72 h后收获病毒。
表 2 不同细胞培养参数转染试剂用量（仅供参考）
|
细胞培养参数 |
转染参数 |
||||
|
细胞密度 |
培养体积 |
总细胞数量 |
复合物体积 |
DNA用量 |
转染试剂体积 |
|
2×106 cells/mL |
30 mL |
6E7 cells |
1.5 mL |
60 μg |
60 μL |
|
1 L |
2E9 cells |
50 mL |
2 mg |
2 mL |
|
|
100 L |
2E11 cells |
5 L |
200 mg |
200 mL |
|
|
2.5×106 cells/mL |
30 mL |
7.5E7 cells |
1.5 mL |
75 μg |
75 μL |
|
1 L |
2.5E9 cells |
50 mL |
2.5 mg |
2.5 mL |
|
|
100 L |
2.5E11 cells |
5 L |
250 mg |
250 mL |
|
注意事项
1. 为提高转染效率，建议悬浮细胞在无血清培养体系中驯化几天后进行转染操作。
2. 转染过程中推荐使用高质量的质粒，如无内毒素、无蛋白和RNA残留的质粒。
3. 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套及通风橱操作。