​​在生物制药与基础免疫学研究领域，单 B 细胞抗体开发技术已成为获取高特异性、高亲和力抗体的核心路径。从技术本质而言，其通过精准分离单个 B 淋巴细胞，对编码抗体的可变区基因进行扩增与解析，旨在还原天然抗体的重链（VH）与轻链（VL）配对，从而构建具备完整功能的重组抗体。这一技术路径虽在理论上具备显著优势，却在实际操作中遭遇诸多棘手难题。

单 B 细胞抗体开发的技术瓶颈与挑战

微量样本的扩增难题

单 B 细胞内 RNA 含量极低，通常仅为 10 - 50pg，这对后续的逆转录及 PCR 扩增提出了严苛要求。传统的 RT - PCR 技术体系，在应对如此微量的起始模板时，极易因引物竞争、酶活性抑制等因素，产生扩增偏差或完全失败，致使大量珍贵样本中的目标抗体基因信息丢失。据相关研究统计，在低起始量（＜50pg RNA）实验条件下，传统方法的有效扩增率不足 30%，严重制约了单 B 细胞抗体开发的效率与成功率 。

抗体可变区多样性的覆盖困境

B 细胞受体（BCR）可变区的多样性源于复杂的基因重组、体细胞高频突变等生物学过程，理论上可产生 10¹² - 10¹⁴种不同的抗体序列。这一高度复杂性使得常规引物设计难以全面覆盖所有可变区。在实际筛选中，由于引物与部分稀有或突变型可变区序列不匹配，导致大量具有潜在治疗价值的特异性抗体序列被遗漏。例如，在针对新型病毒的抗体筛选中，因可变区覆盖不全，可能错过关键的中和抗体序列。

流程复杂性与时间成本

传统的单 B 细胞抗体开发流程，涵盖细胞裂解、RNA 提取、逆转录、多重 PCR 扩增以及产物纯化等多个繁琐步骤，且各步骤间需频繁进行样本转移与处理。整个流程耗时通常超过 12 小时，不仅操作误差风险高，而且长时间的样本暴露增加了核酸降解与污染的可能性，进一步降低了轻重链配对成功的概率。研究表明，传统多步骤流程中，轻重链成功配对率平均仅为 50% -70%。

技术革新：单 B 细胞扩增试剂盒的核心优势

德泰生物研发的 Mouse/Rabbit Single B Cell Amplification Kit，凭借前沿的技术设计，直击上述技术痛点，为单 B 细胞抗体开发提供了高效、精准的解决方案。

微量样本的高效捕获与扩增

该试剂盒采用了自主研发的超敏细胞裂解与逆转录体系，突破性地实现了以 1 - 500 个 B 细胞或 10pg - 5ng 总 RNA 作为起始模板的高效扩增。其核心在于运用了专利的核酸保护技术，通过特殊的缓冲液配方抑制细胞内源性 RNase 活性，同时优化逆转录酶的反应条件，确保在极低模板浓度下仍能维持高效的 cDNA 合成效率。

全面覆盖抗体可变区多样性

针对 BCR 可变区的复杂多样性，试剂盒运用了先进的多重引物池设计策略。全面且精准的引物设计，有效避免了因可变区序列变异导致的扩增遗漏，使抗体可变区序列的覆盖度达到 95% 以上，显著提高了筛选出高特异性、高亲和力抗体的概率 。

一体化扩增流程与时间优化

试剂盒采用三步法技术，将逆转录（RT）、预扩增（PCR1）两个关键步骤整合在同一反应管内进行，这种一体化设计不仅避免了跨管操作带来的样本损失与污染风险，还将整个实验流程大幅缩短至 5 小时以内。实验验证，该试剂盒的轻重链同步扩增成功率稳定维持在 90% 以上，较传统分管扩增方法提升了约 40%，极大地提高了实验效率与结果可靠性 。

产品信息

货号 产品名称 产品规格

DTT06 小鼠单B细胞扩增试剂盒 96 rxns

DTT07 兔单B细胞扩增试剂盒 96 rxns

DTT08 小鼠单B细胞表达框扩增试剂盒 96 rxns

DTT09 兔单B细胞表达框扩增试剂盒 96 rxns